多样性双抗定制平台助力双抗药物早期发现

双特异性抗体药物市场似乎在经历了一段时间的沉寂后，再次展现出蓬勃发展的态势，成为生物制药领域的焦点。

• 7月9日，康诺亚将两款双抗CM512及CM536大中华区以外的全球权益，以NewCo模式授予Belenos Biosciences。

• 8月5日，嘉和生物发布公告，近日与TRC 2004达成许可及股权协议，将GB261（CD20xCD3）除大中华区（中国大陆、香港、澳门及台湾）外全球权益授权给TRC 2004。

• 8月9日，默沙东宣布与同润生物（Curon Biopharmaceutical）达成协议，默沙东收购同润生物的双抗CN201，CN201是靶向CD3xCD19的双特异抗体，目前该项目已经在1/2临床，用于治疗B细胞肿瘤。

• 9月4日，岸迈生物与Vignette Bio, Inc.宣布，双方就岸迈生物靶向BCMA的T细胞接合（TCE）分子EMB-06，达成了一项授权许可协议。

据统计2022年全球双抗市场规模为58亿美元，2023年为80亿美元。全球双特异性抗体药物市场规模预计将在未来几年内持续增长。根据Market Research.com的预测，到2028年，全球双特异性抗体药物市场规模将达到160亿美元，复合年增长率 (CAGR) 为25%。

多因素驱动双特异性抗体药物需求逐渐提升，如对新疗法的需求增加，尤其是在肿瘤、自身免疫疾病、感染性疾病等领域。双特异性抗体药物的独特优势，例如靶向多个靶点、提高疗效、降低毒性等。技术的进步也加快了双抗研发的进展，如单B细胞抗体筛选技术、噬菌体展示技术等，可以更快、更高效地筛选和生产双特异性抗体。AI人工智能技术的应用，同样可以加速靶点发现和抗体设计，提高双特异性抗体的研发效率。

双特异性抗体作用机制

双特异性抗体 (双抗) 的作用机制是其发挥独特治疗效果的关键，它能够同时结合两个不同的靶点，从而产生比传统单克隆抗体更复杂的效果。双抗可按照不同的作用机制分为四类：

1、细胞桥接(Cell Bridging)：双抗可以同时结合两种不同的细胞，将它们连接在一起，从而引发细胞间的相互作用。这类双抗的典型代表是T细胞接合器 (BiTEs)，它可以同时结合肿瘤细胞表面的抗原和T细胞表面的CD3受体，促进T细胞直接杀伤肿瘤细胞。

2、双靶点阻断 (Dual Target Blockade)：双抗可以同时结合肿瘤细胞表面的生长因子受体和其配体，从而阻断生长因子信号通路，抑制肿瘤生长；或者双抗可以同时结合不同受体，阻断细胞间信号传递，抑制细胞迁移。

3、免疫细胞激活 (Immune Cell Activation)：双抗可以同时结合免疫细胞表面的受体或配体，从而解除肿瘤微环境中的免疫抑制或直接激活免疫细胞功能，增强其杀伤活性。/4、促进蛋白形成功能性复合体：双抗可以同时结合功能性复合物的两个亚基，从而形成有功能的复合物，恢复下游的正常信号传递。

双特异性抗体的结构类型

双抗可以根据结构特征分为两类：不含Fc片段的片段型双抗(no IgG-like)和含有Fc片段的全长型双抗(IgG-like)。

• no IgG-like，这类双抗只包含抗体片段，通常是单链抗体片段 (scFv)或Fab片段，不含完整的IgG分子中的Fc 片段，结构简单，易于表达和生产，相对来说，生产成本也较低。代表结构有：Dart双抗、BiTEs(双特异性T细胞接合器)、双特异性Fab片段。

• IgG-like，这类双抗包含完整的IgG分子中的 Fc 片段，通常由两个抗体片段(scFv或Fab) 与Fc片段融合而成。可以利用Fc受体介导的效应功能，例如ADCC和CDC，增强治疗效果。代表结构有：DVD-Ig-Abbott、IgG-(scFv)2-礼来、KIH-Genentech、Crossmab-罗氏等。

双抗开发的难点

• 双特异性抗体 (双抗) 的结构设计和研发确实面临着许多独特的挑战。双抗需要同时结合两个不同的靶点，从而产生比传统单克隆抗体更复杂的效果，这带来了许多需要克服的技术难题。

• 双特异性：双抗需要同时结合两个不同的靶点，这对抗体的结构设计提出了更高的要求。传统的抗体结构设计方法可能无法满足双抗的需求，需要开发新的方法和技术，例如，利用新的连接子、新的抗体片段组合或新的工程化技术来提高双抗的稳定性和可表达性。

• 稳定性和可表达性：双抗的结构比单克隆抗体更加复杂，容易导致抗体的不稳定性，例如，抗体更容易发生降解或聚集，并且表达水平可能较低。需要优化双抗的结构，使其在体内保持稳定，并能够在细胞中高效表达。

• 亲和力和特异性：双抗需要对两个靶点都具有较高的亲和力，才能发挥最佳的治疗效果，同时还需要确保抗体对其他非靶点蛋白具有足够的特异性，避免产生脱靶效应。设计双抗时需要仔细选择靶点，并通过实验验证其亲和力和特异性。

• 靶向性：双抗需要能够精准地靶向特定的细胞或组织，避免对其他组织造成伤害。可以通过设计双抗的结构，使其能够与特定细胞或组织上的特定受体结合，从而提高其靶向性。

百英生物双抗开发平台

百英生物在重组抗体生产技术方面具有扎实的专业知识，拥有高通量双特异性抗体制备和筛选的平台，满足对大量的双抗候选分子进行筛选和评估，可实现双抗的快速构建、优化、批量纯化和功能检测。

案例分享

1、双抗结构：KIH表达（多种类型表达）

案例：A0002（Fab链在N端），双抗分子快速表达仅完成了亲和层析一步纯化。SEC-HPLC和SDS-PAGE均显示纯化后的产物纯度高于95%。

2、双抗结构：Crossmab表达（多种类型表达）

案例：D008（VL-VH互换），双抗分子快速表达完成了亲和层析-SEC两步纯化。SEC-HPLC和SDS-PAGE均显示纯化后的产物纯度高于95%。

3、双抗结构：Y-body表达（多种类型表达）

案例：F0001（scfv（VL-VH）），双抗分子快速表达完成了亲和层析-SEC两步纯化。SEC-HPLC和SDS-PAGE均显示纯化后的产物纯度高于95%。

4、双抗结构：VHH-Mab表达（多种类型表达）

案例：G0001（VHH接重链C端），双抗分子快速表达仅完成了亲和层析一步纯化。SEC-HPLC和SDS-PAGE均显示纯化后的产物纯度高于95%。

5、双抗结构：IgG-scfv表达（多种类型表达）

案例：H0002（scfv接重链c端），双抗分子快速表达仅完成了亲和层析一步纯化。SEC-HPLC和SDS-PAGE均显示纯化后的产物纯度高于95%。

6、双抗结构：Bite表达（多种类型表达）

案例：L0001，双抗分子快速表达仅完成了亲和层析-SEC两步纯化。SEC-HPLC和SDS-PAGE均显示纯化后的产物纯度高于95%。