本月，百英生物联合赛业生物，作主题为“抗体发现 ‘多快好省’方程式！百英生物AbDrop™携手赛业生物HUGO-Ab®倾情打造高通量全人源抗体发现平台”的直播讲座及圆桌讨论，百英生物创始人兼董事长查长春、赛业生物创始人兼董事长韩蓝青、赛业生物研发部总监周顺博士、百英生物高级首席科学家于蒙博士四位嘉宾共聚直播间，基于抗体发现“多、快、好、省”的新策略，与大家共同探讨了抗体药物发展的新动态，以期助力抗体发现，赋能产业发展。
直播期间，各位老师积极互动，我们将问题整理出来进行了解答，以下是本期直播Q&A，感谢各位老师的关注和支持。如有其他问题，可随时联系我们。
A: 正向引物是针对微球上barcode前的通用序列设计的，反向引物是针对抗体重链（Igγ不同亚型）和轻链（Igκ、Igλ）CH1区设计的。 A: 该单细胞建库平台与10x genomics一样也是基于微流控技术，生成包裹单细胞和微球的液滴，没有本质上的区别。 A: 浆细胞。 A: 筛选记忆B细胞和浆细胞各有优劣，选择哪种细胞取决于具体的研究目标和实验需求，同时也取决于实验动物的免疫时间。记忆B细胞是经历过抗原刺激、但尚未分化为浆细胞的B细胞，其分类也比较复杂，通常可以上分为IgM、IgG、IgA阳性的记忆B细胞，其发挥的功能也会有差别。未发生类别转换和体细胞超突变的记忆B细胞（IgM阳性）通常其抗体亲和力低，特异性差，主要是负责重启生发中心反应；发生过类别转换的记忆B细胞（例如IgG阳性）则更倾向于发育成为终末分化的浆细胞，并随着体细胞超突变的启动分泌产生高亲和力的抗体，因此浆细胞往往因为它们已经经过多轮亲和力成熟而产生具有更高亲和力的抗体（可以参考文献Viant, C., et al., Antibody Affinity Shapes the Choice between Memory and Germinal Center B Cell Fates. Cell, 2020. 183(5): p. 1298-1311及免疫学教材）。噬菌体展示（Phage Display）和酵母展示（Yeast Display）技术主要利用B细胞的抗体基因库，构建出多样化的抗体展示文库。这些技术的优势在于，它们可以对抗体基因进行广泛的筛选和优化，从而提高抗体的亲和力、特异性和稳定性。虽然浆细胞可以直接提供高亲和力抗体，但噬菌体和酵母展示技术通过体外的随机组合和大规模筛选，能够在特定应用中获得更高效、更有功能的抗体。因此，即使浆细胞在某些情况下表现出优势，噬菌体和酵母展示文库仍然是不可或缺的抗体筛选与优化手段。 A: 高通量筛选使用的是微流控筛选系统；高通量表达使用的是百英生物另外一个独立的自动化抗体高通量快速表达平台（一周可以完成成百上千个抗体分子的少量表达和纯化以满足初步的验证实验）。 A: 挑选序列分成两步，首先按照频率挑选，频率越高，意味着产生该抗体的一类细胞越有可能是体内克隆增殖而来，完成初步验证之后，我们会构建全部unique序列的进化树，根据初筛的结果在进化树中挑选更多的序列进行验证。 A: 浆细胞微流控分选以后所有经过抗原富集后的浆细胞会再次重新混合到一起，通过V（D）J单细胞建库平台进行建库，测序完成后通过barcode来区分不同单细胞来源的配对抗体轻重链序列。 A: 小鼠的浆细胞直接通过CD138 Beads阳选富集。 A: 频率高的优先，频率低的按照进化树挑选。 A: 是的，第三方试剂盒中的barcode有数十万种，每个beads上都只有一种barcode，可以完全覆盖我们筛选得到的浆细胞。 A: 可以。 A: 影响都很大，可以将两者结合，多只实验动物的样品混到一起进行高通量的筛选。 A: 根据动物的血清效价来判断。例如，百英生物小鼠的免疫效价标准是按照百英的操作方法，效价1000时，OD450大于2，同时满足效价16000时，OD450大于1；兔子的效价100000时，OD450大于1。