重组蛋白表达在治疗和应用领域的需求很高,特别是对于生物技术和制药公司来说,这是一种治疗人类疾病的变革性方法。除了工业用途外,学术研究小组也可以依赖重组蛋白进行功能研究和高分辨率结构确定。
百英生物可提供CHOK1和HEK293的哺乳动物细胞表达服务。哺乳动物蛋白表达通常因其能够产生复杂蛋白和翻译后修饰(PTM)能力而被青睐,此外还有抗原制备、抗体发现和结构及功能研究。
除此之外,百英生物也有依据大肠杆菌(E. Coli)的原核蛋白表达系统,E. Coli具有快速培养和易于遗传操作的优点,并且产生多样化蛋白类型方面有着良好的表现记录。百英生物的重组蛋白表达平台,表达的蛋白产品质量高、表达周期快,同时保证性价比,欢迎咨询!
通过哺乳动物细胞系统技术进行的表达通常始于您所选序列的合成。在构建质粒载体之后,我们将重组载体转染进CHOK1(中国仓鼠卵巢)细胞或HEK293(人类胚胎肾)细胞中进行蛋白质的表达和纯化,并采用严格的质量控制措施SDS-PAGE分析,来确认其存在和纯度。
通过E. coli进行的表达是一个多步骤的过程,它始于设计并构建一个携带所需蛋白质基因序列的质粒。此后,该质粒被转化入目标宿主工程菌中,然后在受控条件下培养以促进细菌生长并通过诱导剂诱导蛋白表达。达到最佳表达水平后,细菌被裂解以释放蛋白质,然后使用包括亲和层析或离子交换在内的等多种纯化方法进行纯化。
通过哺乳动物细胞进行的表达是临床使用的重组蛋白生产系统的首选,数百个生物制药候选产品正在临床开发中。
Service Step | 服务详情 | 周期 | 交付物 |
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基因合成和亚克隆 |
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2-3周 |
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100ml小量表达 |
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大规模表达纯化(1L-100L) |
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2-3周 |
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R: Reducing condition;
N-R: Non-reducing condition;
M: Marker
R: reducing condition;
M: Marker
Human CD137L/mFC; Human CD137/ His;
Recombinant Human CD137/His is captured on Protein A chip, can bind to Human CD137L/mFc.
Log Human CD137, His tag EC50=4ng/ml
CD137 is immobilized at 2µg/mL (100 µL/well), it can bind to Utomilumab. The concentration for 50% of maximal effect(EC50) of is 4 ng/ml.
Log Human CD137, His tag EC50=20ng/ml
CD137 is immobilized at 2µg/mL (100 µL/well), it can bind to Human CD137L. The concentration for 50% of maximal effect(EC50) of is 20 ng/ml.
使用哺乳动物宿主系统是产生最生理原生的重组蛋白的理想选择,如果需要的话,可以进行正确的磷酸化或适当折叠,以便在人类中用于治疗使用。
根据客户的需求,百英生物提供CHO-K1和HEK293细胞,使用哺乳动物细胞系统进行表达。 一般情况下,如果客户需要更高纯度的蛋白,我们会建议使用HEK293细胞制备融合蛋白。如果客户需要高产量的抗体,我们比较推荐使用CHO-K1细胞。