纳米抗体制备服务

纳米抗体制备服务

VHH antibody是参考骆驼及美洲驼的单域抗体结构( 无轻链及CH1 区) ,将2 个或多个抗体分子的VH 区进行连接而实现多特异性结合,简化结构仍保留VH区。该类产品的主要优点是分子小、稳定性高、免疫原性低、易于人源化、易于连接,并可通过多种途径进行给药。此外,在分子设计时可选择加入与人血白蛋白结合的功能区,将半衰期延长至2 -3 周,并且可以通过白蛋白将药物运输至靶位点。这些特点使得 VHH 在基础研究、诊断及治疗上具有极大的应用价值。

百英生物拥有高通量单域抗体生产的经验,丰富的VHH及HcAb定制经验可为客户提供基于HcAb纳米抗体研发与生产的全方位的服务。同时提供抗体药物的一站式筛选平台,有配套的纳米抗体人源化和亲和力成熟等抗体工程改造服务。

我们的优势

自建羊驼基地
自建羊驼基地

100只以上羊驼

保证 20+ 序列
保证 20+ 序列

同时进行固相和液相淘选

高丰度,高库容
高丰度,高库容

2免,3免,4免分开建库,保证最大库容

纳米抗体制备服务流程


纳米抗体制备服务 Working Flowchart

纳米抗体制备服务

步骤服务内容
周期交付
第一步: 抗原准备 /抗原验证客户提供抗原或者百英制备抗原

2周 抗原制备;

2-3天抗原验证

1mg 纯化后的抗原(百英定制).

如果客户提供抗原,质量标准:

1. >4mg

2. SDS-PAGE >95%

3. Endotoxin <1EU/mg

第二步: 羊驼免疫与PBMC分离

5 ml 未免疫血清

测定ELISA效价(2免,3免,4免)

50ml PMBC (2免,3免,4免),存放在Trizol 中

8-11 周

如果由于抗原毒性导致的羊驼死亡,需要收取一定费用

根据 ELISA结果(2免,3免,4免),客户决定如何建库

第三步: 噬菌体文库构建

RNA 抽提和cDNA 准备

VHH 抗体库构建

E. coli电转感受态制备

免疫库丰度和库容测定

克隆筛选和测序验证

3-5 周

VHH 库容 ~1*109

第四步: 噬菌体文库淘选

至少3轮淘选(液相和固相)

 阳性克隆的ELISA验证、鉴定、筛选和测序(200个克隆测序)

阳性克隆测序及测序结果分析

10-12 周

保证至少 20 个序列

VHH-Fc 抗体生产(选做)   

基因合成、亚克隆、质粒制备

瞬时表达与纯化

质控分析

2 周纯化的抗体 (SDS-PAGE >95%, Endotoxin <1EU/mg)
亲和力排序 (选做)Biacore T2001-2 周
备注: 如果 4免后ELISA 效价低于1:5,000, 我们建议终止项目,收取第一步和第二步费用。
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