双特异性抗体表达

双特异性抗体表达

双特异性抗体 ( Bispecific Antibodies ) 又称双功能抗体,是一类具有双功能的杂交抗体分子,具有两个不同的抗原特异性结合的Fab段,能与不同的配体结合,可以通过特异性结合肿瘤抗原同时结合不同的效应细胞和分子,在靶细胞和功能分子之间架桥,达到定向杀伤肿瘤细胞的作用。

双特异性抗体凭借其双特异性发挥了巨大的应用优势,多种类型的双特异性抗体被应用于克服细胞因子释放引起的半衰期、免疫原性和副作用等,其中应用最广泛的是在肿瘤免疫治疗阶段,双特异性抗体为有特定医疗需求的疾病创造了一种治疗方法。

百英在重组抗体生产技术方面具有扎实的专业知识,因此在提供双特异性抗体定制服务方面拥有丰富的生产经验。我们能够提供表达和纯化的构建以及重组抗体生产服务,规模可以从数百微克达到克的水平。

我们的优势

高通量
高通量

单次500+克隆

丰富的双特异性抗体定制服务
丰富的双特异性抗体定制服务

各种结构均可定制

快速交付
快速交付

从基因合成到抗体纯化只需要3周

双特异性抗体表达流程


双特异性抗体表达 Working Flowchart

双特异性抗体定制服务

步骤服务描述周期交付

基因合成和亚克隆

密码子优化和基因合成

亚克隆到表达质粒

质粒验证和大量抽提

1-2 周

纯化的抗体蛋白 (SDS-PAGE>95%, Endotoxin <1EU/mg)

COA 报告

SEC-HPLC检测

CIEF检测(选做)、CE-SDS检测(选做)

瞬时转染和纯化

细胞瞬时转染

抗体蛋白纯化

QC检测

1 周


IgG-scFv表达

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Lane N-R: Non-Reducing、Lane    R: Reducing、Lane    M: Protein Marker


体外组装实验:还原反应/氧化反应

体外组装实验样品编号样品说明

还原反应

11.png

泳道①F405L突变原液
泳道②K409R突变原液
泳道③还原方案1:抗体的非还原电泳
泳道④还原方案2:抗体的非还原电泳
泳道⑤还原方案3:抗体的非还原电泳

氧化反应

22.png

泳道①

氧化方案1:抗体的非还原电泳
泳道②氧化方案2:抗体的非还原电泳
泳道③氧化方案3:抗体的非还原电泳


体外组装检测验证:ciEF检测组装成功

体外组装检测验证等电点预测(软件计算)
33.png

F405L对称结构

8.4
K409R对称结构7.85
正确组装后

8.24


体外组装检测验证:质谱检测组装成功

44.png55.png

仪器设备

双特异性抗体表达仪器
双特异性抗体表达仪器
双特异性抗体表达仪器
双特异性抗体表达仪器
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